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Estabilidad del ARN para las pruebas de Biología molecular

La protección de ARN de la degradación y que mantenga su actividad biológica, es esencial en la biología molecular. Sin embargo, es muy sensible a la degradación de ARN por ribonucleasas, especialmente a temperaturas superiores a 0ºC. La estabilidad de ARN se examinó a 4ºC y -20ºC, en una nueva solución de estabilización que consiste en una mezcla de baja molaridad de agentes caotrópicos como tiocianato de guanidinio y de amonio, un buffer para la estabilización del pH, fenol, y el ARN de levadura. Se ensayaron dos sustratos para el almacenamiento: ARN en plasma humano positivo para el virus de la hepatitis C (VHC) y el ARN desnudo (purificado a partir de plasma humano positivo para VHC o transcrito in vitro). La estabilidad fue seguida por la estimación de carga viral, usando un ensayo de RT-PCR. El ARN desnudo purificado a partir de plasma humano positivo para VHC fue estable a 4ºC durante al menos 24 meses. Un ARN normal transcrito in vitro era todavía viable después de 36 meses de almacenamiento a 4ºC. El ARN desnudo purificado a partir de plasma humano positivo para VHC fue estable durante al menos 5 meses en esta solución cuando se almacena a 4ºC. Se concluyó que la solución estabilizante descrita garantiza la estabilidad a largo plazo en el ARN desnudo a 4ºC, y es ideal para el almacenamiento de los controles y los estándares para el diagnóstico molecular de ARN. La solución puede ser utilizada para la conservación de muestras clínicas previo a su transporte a un laboratorio clínico.

Bibliografía

En inglés

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En español

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